![\"\"](\"http:\/\/www.vialattea.net\/spaw\/image\/biologia\/glycoprotein.jpg\"\/)
<\/p>\nL\u2019affermazione \u00e8 a grandi linee vera, sono le glicoproteine a contribuire in maggior parte alla PAS-positivit\u00e0 del connettivo ma molto dipende sia dalle condizioni in cui viene effettuata la reazione e dalla composizione relativa delle glicoproteine e dei proteoglicani presenti nel tessuto in questione. <\/p>\n
A livello di matrice extracellulare nel connettivo sono presenti due grandi classi di macromolecole: glicoproteine e proteoglicani.
Le glicoproteine sono proteine a cui sono legati covalentemente catene di polisaccaridi costituiti principalmente da mannosio, glucosio e N-glucosammina. <\/p>\n
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Glicoproteina. Legame del primo zucchero della catena polisaccaridica all\u2019aminoacido della proteina. da http:\/\/www.uic.edu\/classes\/bios\/bios100\/lectf03am<\/a> <\/p>\n Un proteoglicano \u00e8 costituito da un core proteico a cui \u00e8 legato un numero moto elevato di catene polisaccaridiche che prendono il nome di glicosammino glicani (GAG). I GAG sono polisaccaridi la cui unit\u00e0 dimerica ripetuta contiene sempre un amminozucchero. I GAG si trovano raramente liberi nella matrice, ad eccezione dell\u2019acido ialuronico che non partecipa alla formazione dei proteoglicani. Spesso le catene polisaccaridiche sono alterate dall\u2019aggiunta di gruppi solfato (ad es. nel condroitin solfato e nel dermatan solfato). Alla base della reazione acido periodico-Schiff (PAS) c\u2019\u00e8 la capacit\u00e0 di alcuni agenti ossidanti, quali l\u2019acido periodico appunto, di ossidare i gruppi gli colici, contenenti gruppi OH vicini, a gruppi aldeidici: <\/p>\n R-CHOH-CHOH-R\u2019 + HIO4<\/sub> ⇒RCHO + R\u2019CHO + H2<\/sub>O + HIO3<\/sub> <\/p>\n L\u2019acido periodico ossida anche i composti carbonilici in cui il gruppo carbonilico \u00e8 adiacente a un gruppo idrossilico: <\/p>\n R-CHOH-C(=O)-R\u2019 + HIO4<\/sub>\u00a0⇒ RCHO + R\u2019COOH + HIO3<\/sub> <\/p>\n Il reattivo di Schiff, che \u00e8 una fucsina solforata decolorata con carbone attivo, reagisce rapidamente con le aldeidi, mentre necessita di maggior tempo per reagire con i chetoni. Quindi la colorazione finale di un tessuto dipender\u00e0, oltre che dal tipo di ossidazione, anche dal tempo di esposizione al reagente di Schiff. Dati di letteratura riportano la PAS negativit\u00e0 sia dell\u2019acido ialuronico che di proteoglicani quali il condrotin solfato. L\u2019acido ialuronico infatti pu\u00f2 reagire con l\u2019acido periodico a livello di C2 e C3 ma le condizioni acide favoriscono la formazione del 3:6 lattone, che non reagisce con il reattivo di Schiff (Stacey e Barker, 1962). <\/p>\n![\"\"\/](\"http:\/\/www.vialattea.net\/spaw\/image\/biologia\/image010.jpg\")
Struttura di un proteoglicano. Da\u00a0\u00a0www.cella.cn\/book\/10\/01.htm<\/a>\u00a0 <\/p>\n
Le sostanze che reagiscono con l\u2019acido periodico sono:
\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 – composti carboniosi ciclici poliidrossilati
\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 – carboidrati
\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 – alfa-dichetoni e alfa-ketoli
\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 – composti idrossiamminici
\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 – poliidrossi- e idrossicheto acidi
\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 – alcoli poliidrossilati
\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 – steroidi
Quindi la colorazione acido periodico-reattivo di Schiff \u00e8 particolarmente utile per determinare la presenza di alcune molecole all’interno di un tessuto, anche se non si pu\u00f2 discriminarle in maniera precisa. In associazione con la colorazione Alcian Blu, la PAS viene utilizzata per analizzare, ad esempio, la composizione territoriale della matrice della cartilagine e dell’osso, permettendo di identificare le zone di ossificazione della matrice cartilaginea.<\/p>\n![\"\"](\"http:\/\/www.vialattea.net\/spaw\/image\/biologia\/fig5_3.gif\"\/)
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