La prima applicazione pratica di questo test in ambito giudiziario avvenne nel 1985 in Gran Bretagna e consiste nell\u2019esaminare e confrontare frammenti di DNA proveniente dal genitore con quelli del figlio. Da allora sono state condotte numerose ricerche e sono perci\u00f2 stati individuati loci genetici sempre pi\u00f9 discriminanti, utilizzando metodi analitici sempre pi\u00f9 specifici. <\/p>\n
Dato che nel DNA risiede tutta l\u2019informazione genetica caratteristica di ogni individuo, la prima fase del test di paternit\u00e0 consiste nell\u2019estrazione del DNA dai campioni biologici. <\/p>\n
Successivamente vengono selezionate 9-15 regioni del DNA (loci; locus al singolare) altamente polimorfiche in lunghezza, e amplificabili a partire da brevi sequenze di circa 20 bp, dette primers. Tali regioni sono variabili da individuo a individuo, e sono conosciute come “regioni microsatelliti” o STR (Short Tandem Repeats). Ciascun locus \u00e8 delimitato da una coppia specifica di primer, uno a monte e uno a valle, che permettono l\u2019amplificazione selettiva del frammento di interesse.\u00a0
Le regioni selezionate (oppure i loci selezionati) vengono amplificati in vitro\u00a0con l\u2019utilizzo della Polymerase Chain Reaction (acronimo: PCR), che consente di ottenere in vitro moltissime copie di una specifica regione del DNA, nel nostro caso dei primer.
In pratica, considerando la molecola del DNA come un grosso libro e le regioni Microsatelliti (STR) del DNA come una pagina di questo libro, con la metodica di PCR si “fotocopia” milioni di volte questa pagina, fino ad ottenerne una quantit\u00e0 idonea per l\u2019esecuzione dell\u2019esame. <\/p>\n
Infine, dopo la reazione di amplificazione enzimatica il profilo genetico viene determinato automaticamente mediante l\u2019impiego di un sequenziatore automatico a tecnologia fluorescente. <\/p>\n
I frammenti di DNA amplificati sono quindi separati per dimensione e analizzati. <\/p>\n
Poich\u00e9 il DNA \u00e8 uguale in ogni cellula di un individuo, il materiale genetico da cui selezionare i primer pu\u00f2 derivare da tessuti diversi.
Normalmente si effettua un prelievo di sangue periferico. Il volume di sangue necessario \u00e8 molto piccolo (anche poche gocce di sangue essicato), cos\u00ec da permettere l\u2019analisi anche su neonati.
Il test di paternit\u00e0 pu\u00f2 essere effettuato anche da campioni biologici differenti dal tradizionale prelievo ematico.
\u00c8 infatti possibile eseguire l\u2019accertamento di paternit\u00e0 anche su campioni biologici ottenibili con metodiche di prelievo non invasive, quali il tampone buccale, capelli, urine, liquido seminale, saliva o cellule da tessuti diversi. <\/p>\n
Le analisi basate sulla tipizzazione del DNA sono ormai molto attendibili, tuttavia non possono essere considerate esenti da inesattezze. Oltre a errori umani (scambio di campioni, cattiva conservazione dei reperti) esiste una serie di fattori interferenti di cui occorre sempre tener conto durante la PCR. <\/p>\n